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本制品利用表面活性剂和蛋白变性剂使样品快速充分破裂从而释放蛋白质，内含作用强烈的蛋白酶抑制剂，从而保证了蛋白质的完整性。适用于动物组织和培养细胞蛋白及重组蛋白质的变性提取，提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE，Western blot等实验。 产品为1X的缓冲液，可以处理1,000mg组织样品或者5×10⁸个细胞。

• 溶液A在2～8℃的冰箱冷藏室中保存，如果产生沉淀，可以先水浴30℃加热5min，使其充分溶解。
  
• 充分裂解后溶液是很透明而且不太粘的，如果裂解后溶液比较粘，可以使用超声破碎仪并延长破碎的次数。
  
• 裂解液中含有较高浓度的去垢剂，不建议使用普通的Bradford法做定量，建议使用BCA蛋白质定量检测试剂盒(货号：GS1480)或改良型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒(货号：GS1487)测定蛋白浓度。
  
• 在细胞裂解时，如果在进行步骤4前裂解液比较粘，可以先匀浆或超声以剪断基因组，再离心取上清。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
  
• 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 实体组织蛋白提取
  
  • 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，用1X PBS洗涤两次，离心取沉淀后加入1mL预冷的溶液A和10μL溶液B，置玻璃匀浆器冰上均质30～50次，待组织已经完全裂解，没有明显的小组织块即可。
    
  • 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，在冰上放置10min，期间剧烈振荡3～4次，转置冷冻离心机中，4℃，12000rpm（12830g），离心5min。
    
  • 取上清转移至新的预冷的离心管中，进行蛋白定量。分装保存于-70℃，避免反复冻融。
• 培养细胞蛋白提取
  
  • 对于贴壁细胞，去除培养液，用1X PBS洗两遍。
    
  • 对于悬浮细胞，1000rpm（500g）离心5～10min收集细胞，用1X PBS洗两遍。
    
  • 通常每10⁷个细胞或100mm培养板及150cm2培养瓶，可加1mL溶液A和10μL溶液B，裂解液和细胞应充分接触。
    
  • 冰上静置5～10min，为促进细胞裂解，可用枪头轻轻吹打，轻轻倾斜培养皿使裂解产物流向瓶皿的一边或一角，然后将之转移到1.5mL离心管。在冰上静置5min，期间剧烈振荡3～4次，每次30sec。或超声破碎细胞，每次10sec，2～3次，每次间隔5sec，置于冰上冷却，超声破碎细胞后应镜检，细胞破碎率不小于90%
    
  • 转置冷冻离心机，4℃，12000rpm（12830g)离心5min，保留上清进行后续实验。